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FAQ——Solarbio小分子化合物溶解篇


Q:小分子化合物产品溶解后,可以保存多久?

A:(1)参考说明书中推荐的保存条件和保存时间,一般建议配置为储存液后,分装保存,尽量避免反复冻存;在-20℃下可保存1个月

(2)对于不稳定的化合物,建议现配现用

(3)工作液建议现配现用,不建议保存后多次使用

 

Q:小分子化合物产品说明书中只提到用DMSO或是其他有机溶剂溶解,但是DMSO本身有毒,如果对细胞/动物造成损伤怎么办?

A对于溶于DMSO的试剂,一般在细胞实验中,建议其终浓度在0.1%以下这个浓度对于绝大多是细胞而言,是非常保守的,基本不会有明显的影响。而在动物实验中,对于正常鼠,建议DMSO的终浓度不大于10%;对于裸鼠或体弱鼠,建议DMSO的终浓度尽量不要超过2%

如果不清楚自己用的细胞/动物对DMSO或者是其他有机溶剂的耐受性,可以提前做一个溶剂的浓度梯度实验,选择一个最合适的浓度范围。同时在正式实验中,做好对照实验,就可以放心实验了。

 

Q为什么你们家的顺铂等化合物建议用DMF溶解而不是DMSO明明很多文献中均使用DMSO溶解的。

A因为Solarbio一直有专人负责小分子化合物系列产品的资料查询、验证、更新。我们了解到对于顺铂、卡铂、奥沙利铂等化合物,DMSO会对其活性造成损伤,从而导致实验结果不准确。因此,Solarbio建议使用DMF溶解此类物质。

参考文献:Hall MD, Telma KA, Chang KE, Lee TD, Madigan JP, Lloyd JR, Goldlust IS, Hoeschele JD, Gottesman MM. Say no to DMSO: dimethylsulfoxide inactivates cisplatin, carboplatin, and other platinum complexes. Cancer Res. 2014 Jul 15;74(14):3913-22. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-14-0247. Epub 2014 May 8. PMID: 24812268; PMCID: PMC4153432.

 

Q:小分子化合物产品一定要根据你们说明书上推荐的溶剂和浓度溶解吗

A1)说明书中提供的溶剂和溶解度仅供参考。目前,对于绝大多数产品,Solarbio只提供在 DMSO或水中的溶解度,溶解度的质检范围在10 mM以内。Solarbio并没有检测该化合物所有可能的溶剂,也没有检测溶解的最大饱和度。

2)您可以选择您认为合适的溶剂或浓度进行溶解,也可以选择参考文献中提供的溶剂和浓度。但建议您先进行少量验证。

 

Q:小分子化合物产品DMSO溶解后,可以直接用培养基、无菌水、PBS等缓冲液或生理盐水稀释吗

A建议先进行少量验证,观察有无析出后,再进行正式实验。稀释过程建议分段进行,避免浓度变化过快导致化合物析出。若稀释过程中出现化合物析出的情况,一般可采用超声的方法使其复溶。实验环境温度过低时,可先预热DMSO储存液和培养基等稀释液然后再进行稀释,可以减少析出的可能性

 

Q在细胞实验中,小分子化合物产品应该如何溶解/稀释?

AWater配制的储备液,可以直接用培养基、缓冲液或无菌水稀释到所需的工作液浓度。

DMSO配制的储备液,在稀释时要确保工作液中 DMSO 的终浓度保证在千分之一以下 ,同时设置相应浓度的 DMSO 空白(大部分细胞了均可耐受低浓度(<1/1000)的DMSO,但部分细胞对DMSO极敏感,建议在实验前先进行DMSO梯度检测) 

稀释过程建议分段进行,避免浓度变化过快导致化合物析出。若稀释过程中出现化合物析出的情况,一般可采用超声的方法使其复溶。

官网产品详情页面会提供文献中使用的溶解和处理方式,所有数据均不是Solarbio实际测得的结果,Solarbio尚未独立检测过这些方法,不保证其有效性和权威性,仅供参考交流使用

 

Q在动物实验中产品应该如何溶解/稀释

AWater配制的储备液,可以直接用生理盐水缓冲液或无菌水稀释到所需的工作液浓度。

DMSO配制的储备液,也可以用生理盐水缓冲液或无菌水稀释,有些产品在水中的溶解度很低,DMSO 配制的储备液在稀释过程中可能出现析出的情况,可以通过添加助溶剂来帮助溶解,比如 Tween80IT9000 、甘油IG0910、羧甲基纤维素钠IS9000/IS9001 PEG400IP9000 等。为排除溶剂对动物的毒性,建议设置相应浓度的溶剂对照

优先推荐您使用完全溶解的澄清溶液,以避免造成实验误差或对实验动物产生不可逆的影响一般情况下,悬浊液可用于口服和腹腔注射,不会影响产品活性,但可能影响吸收,造成较大误差。

如需帮助,请发送邮件至技术支持邮箱service@solarbio.com咨询。

官网产品详情页面会提供文献中使用的溶解和给药方式,所有数据均不是Solarbio实际测得的结果,Solarbio尚未独立检测过这些方法,不保证其有效性和权威性,仅供参考交流使用

 

Q:小分子化合物产品如何制备成储备液?

A可以根据实验需求,选择合适的溶剂制备储备液。

溶解度信息可在Solarbio说明书或官网查询,出现难溶情况,可以根据产品性质,采用水浴加热超声震荡或添加合适的助溶剂等方式辅助溶解

目前我们只提供产品在 DMSO或水中的溶解度,溶解度的质检范围在10 mM以内如需要其他浓度溶解,或者采用说明书给出的溶剂以外的试剂溶解,则需要自行验证溶解信息或查询参考相关文献资料

 

Q:购买了大规格的小分子化合物产品,但是存放产品的棕色瓶体积过小,无法加入全部溶剂怎么办

A:可以先分步溶解再转移至大容器处理。例如总共需要加入5mL溶剂,瓶子只能放下1mL,可先往原包装的瓶子中加1mL溶剂进行溶解,然后吸出到一个准备好的干净的大容器中。再往原包装的瓶子中加入1mL溶剂进行溶解,然后吸出到刚才的大容器中。重复该步骤,直至加够5mL,保证原包装的瓶子中无残留,最后在大容器中进行充分溶解。

 

Q助溶剂有什么作用

A助溶剂一般是在动物实验中使用。用DMSO 配制的储存液如果直接用生理盐水或无菌水稀释成工作液,有可能出现析出的情况,这时就需要用到助溶剂。例如,Tween80IT9000 玉米油(IC9000、羧甲基纤维素钠IS9000/IS9001 PEG300IP9020等等。至于具体选用哪一种溶剂,使用比例是多少,建议查询相关文献,参考与您实验需求相似的文献。

 

QDMSO溶解的小分子化合物,怎么灭菌?

ADMSO本身具有极强的抑菌作用,一般可以将溶于DMSO的试剂默认为无菌溶液,常规下按照无菌溶液操作即可。若您的实验需要严格无菌,建议使用0.22 μm以下的有机相滤器进行过滤除菌,切忌高温高压灭菌,否则会对产品造成不可逆的影响。

 

Q如何选择溶解的溶剂

A没有最好的溶剂,只有最适合的溶剂。同一个溶剂可以很好的用于一类实验,但不一定可以被用于另一类实验。建议多查询相关的文献进行参考。

 

Q担心DMSO对小鼠造成损伤,可以随意降低溶液中DMSO的比例吗

A:只要溶解度允许,可以降低DMSO含量,建议取少量进行实验看是否会有析出。确认无误后,即可按照实验的比例进行调整。

 

Q在动物实验中,没有PEG300,可以用PEG400等替代吗?

A:可以。但仍首推PEG300

 

Q在动物实验中,没有Tween-80,可以用Tween-20/40/60等替代吗?

A建议查询是否有文献明确提到有使用Tween-20/40/60进行溶解小分子化合物的,如果有,可以进行尝试。如果没有,建议设计一个溶剂耐受性实验和溶剂对药物活性影响的实验,验证后再进行正式实验。

目前,Soolarbio查询到相较于Tween-20Tween-80的耐受性更好,Tween-80已被用作评估实验药物和毒物的行为影响的工具,且没有明显的副作用。

参考文献:Castro CA, Hogan JB, Benson KA, Shehata CW, Landauer MR. Behavioral effects of vehicles: DMSO, ethanol, Tween-20, Tween-80, and emulphor-620. Pharmacol Biochem Behav. 1995 Apr;50(4):521-6. doi: 10.1016/0091-3057(94)00331-9. PMID: 7617697.

 

Q:小分子化合物说明书没有写怎么溶解。

A请看说明书第二页(背面)的溶解度信息。一般的,首行为推荐溶剂;下方的表格为配制相应摩尔浓度所需称量的化合物质量(Mass)和溶剂用量(Solvent)。一般建议先配制成储存液进行储存。使用时再稀释到相应的工作液浓度。

 

Q: 化合物在DMSO中溶解的很好,但用水性溶剂稀释时有固体析出,怎么办?

A:这种现象是十分常见的,可以通过涡旋、超声和37℃水浴加热重新溶解;注意在使用溶液时确认沉淀已经完全溶解。

 

 

 


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