产品介绍：

RiboGreen试剂为 RNA 定量提供了超灵敏方法。在分子生物学实验中，小量 RNA 的检测和定量是非常重要的一步，其中包括体外转录 RNA 的产量检测、 Northern 印迹分析前 RNA 浓度测定、S1 核酸酶化验、核酶保护分析/cDNA 文库构建、RT- PCR 和差异显示 PCR。

测量核酸浓度的常规方法是在 260 nm (A260)波长下测量核酸溶液的吸光值。 这种方法的主要缺点是蛋白和游离核苷酸对光信号具有较大的干扰，无法区分 DNA 和 RNA。 一般来说，RNA浓度为4μg/mL 时 A260 ＝0.1，检测不够灵敏。而应用荧光核酸染料能够避免很多由于核酸污染引起的问题。

RiboGreen 能定量浓度低至1ng/mL的RNA，通过荧光酶标仪、标准荧光光度计等来进行测量，RiboGreen结合RNA之后的最大激发波长～500nm，最大发射波长～525nm。灵敏度超过了溴化乙锭荧光分析 200 倍，比A260 （紫外吸收峰） 的分析方法高1000 倍。RiboGreen可用两种不同浓度， 使得测量的 RNA 浓度线性范围达到 2.5 个数量级以上。使用高浓度的 RiboGreen工作液及其相应操作步骤， 能够定量检测浓度为 25 ng/mL 到 500 ng/mL 的 RNA。使用低浓度的 RiboGreen工作液及其相应操作步骤，能够定量检测浓度范围在 1 ng/mL 到 50 ng/mL 的 RNA 溶液，即使 RNA 溶液中有几种常见杂质存在时仍能保持线性关系。 在选择性的分析 RNA 时， 由于DNA 也会与RiboGreen试剂相结合，在前处理中仍建议使用 DNA 酶来去除混合样品中 DNA。

注意：按照2ml的反应体系来计算（比色皿），100ul规格可做20次反应（高浓度25ng/ml-500ng/ml），200次反应（低浓度1ng/mL-50ng/mL）

所需器材：

微型荧光计，微量检测皿适配器，荧光酶标仪，全黑的96孔板，10×10mm 荧光比色皿（体积2ml）