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RiboGreen RNA 定量检测试剂盒

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RiboGreen RNA 定量检测试剂盒
Cat.No:
P9745
Brand:
Solarbio

产品介绍:

RiboGreen试剂为 RNA 定量提供了超灵敏方法。在分子生物学实验中,小量 RNA 的检测和定量是非常重要的一步,其中包括体外转录 RNA 的产量检测、 Northern 印迹分析前 RNA 浓度测定、S1 核酸酶化验、核酶保护分析/cDNA 文库构建、RT- PCR 和差异显示 PCR。

测量核酸浓度的常规方法是在 260 nm (A260)波长下测量核酸溶液的吸光值。 这种方法的主要缺点是蛋白和游离核苷酸对光信号具有较大的干扰,无法区分 DNA 和 RNA。 一般来说,RNA浓度为4μg/mL 时 A260 =0.1,检测不够灵敏。而应用荧光核酸染料能够避免很多由于核酸污染引起的问题。

RiboGreen 能定量浓度低至1ng/mL的RNA,通过荧光酶标仪、标准荧光光度计等来进行测量,RiboGreen结合RNA之后的最大激发波长~500nm,最大发射波长~525nm。灵敏度超过了溴化乙锭荧光分析 200 倍,比A260 (紫外吸收峰) 的分析方法高1000 倍。RiboGreen可用两种不同浓度, 使得测量的 RNA 浓度线性范围达到 2.5 个数量级以上。使用高浓度的 RiboGreen工作液及其相应操作步骤, 能够定量检测浓度为 25 ng/mL 到 500 ng/mL 的 RNA。使用低浓度的 RiboGreen工作液及其相应操作步骤,能够定量检测浓度范围在 1 ng/mL 到 50 ng/mL 的 RNA 溶液,即使 RNA 溶液中有几种常见杂质存在时仍能保持线性关系。 在选择性的分析 RNA 时, 由于DNA 也会与RiboGreen试剂相结合,在前处理中仍建议使用 DNA 酶来去除混合样品中 DNA。

注意:按照2ml的反应体系来计算(比色皿),100ul规格可做20次反应(高浓度25ng/ml-500ng/ml),200次反应(低浓度1ng/mL-50ng/mL)

所需器材:

微型荧光计,微量检测皿适配器,荧光酶标仪,全黑的96孔板,10×10mm 荧光比色皿(体积2ml)

Remark:
These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

Note:
1. The products are all for scientific research use only. Do not use it for medical, clinical diagnosis or treatment, food and cosmetics, etc. Do not store them in ordinary residential areas.
2. For your safety and health, please wear laboratory clothes, disposable gloves and masks.
3. The experimental results may be affected by many factors, after-sale service is limited to the product itself and does not involve other compensation.
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