| CAS |
372196-77-5 |
| English Name |
PIK-75 hydrochloride |
| Synonyms |
2-甲基-5-硝基苯磺酸 [(6-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)亚甲基]甲基肼盐酸盐;PIK-75 HCl; |
| Molecular Formula |
C16H15BrClN5O4S |
| Molecular Weight |
488.74 |
| Solubility |
Soluble in DMSO |
| Purity |
≥98% |
| Appearance |
White to off-white Solid |
| Storage |
Powder:2-8℃，2 years;Insolvent(Mother Liquid):-20℃，6 months;-80℃，1 year |
| MDL |
MFCD01321139 |
| SMILES |
BrC(C=C1)=CN2C1=NC=C2/C=N/N(S(=O)(C3=C(C=CC([N+]([O-])=O)=C3)C)=O)C.[H]Cl |
| Target Point |
DNA-PK |
| Passage |
DNA Damage/DNA Repair |
| Background |
PIK-75 is a DNA-PK and PI3K inhibitor. |
| Biological Activity |
PIK-75 是一种 DNA-PK 和 PI3K 抑制剂，抑制 DNA-PK，p110α 和 p110γ，IC50 分别为 2, 5.8 和 76 nM。PIK-75 抑制 p110α 效果比抑制 p110β (IC50=1.3 μM) 高 200 多倍。[1-3] |
| IC50 |
DNA-PK:2nM;p110β:1.3μM;hsVPS34:2.6μM;PI3KC2β:1μM;mTORC1:1μM;ATM:2.3μM [1-3] |
| In Vitro |
PIK-75是一种竞争性p110α抑制剂，相对于底物磷脂酰肌醇(PI)，与大多数其他PI3K抑制剂相反，后者在ATP位点或其附近结合。使用序列分析和抑制剂复合物与p110γ和p110δ同种型的现有晶体结构，鉴定了非保守氨基酸的新区域(区域2)，其被假定参与PIK-75p110α选择性。使用鉴定的非保守氨基酸至丙氨酸的体外突变对区域2进行分析，表明Ser773是参与PIK-75结合的关键氨基酸，与野生型相比，IC50增加8倍。进行进一步的动力学实验以确定PIK-75对ATP和PI与p11αS773D突变体结合的动力学的影响。使用浓度为0，50，100和200nM PIK-75的一系列PI浓度估计活性。 PI的Km为11.2μM，而野生型酶的Km为7.0μM。 PIK-75的Ki估计为146 nM，比野生型酶(2.3 nM)的估计值增加64倍[2]。PIK-75单独阻断L6肌管和3T3-L1脂肪细胞中的Thr308磷酸化，IC50值分别为1.2和1.3μM[1]。 用递增浓度的PIK-75处理MIA PaCa-2和AsPC-1细胞48小时，并通过MTT测定法测定细胞活力。 PIK-75通过凋亡细胞死亡抑制胰腺癌细胞的增殖。亚微米浓度的PIK-75足以在48小时处理后抑制胰腺癌，MIA PaCa-2和AsPC-1细胞的增殖。 PIK-75还可以减少胰腺癌MIA PaCa-2和AsPC-1细胞的集落形成[3] |
| In Vivo |
PIK-75增强吉西他滨在体内的抗肿瘤作用。通过体内小鼠异种移植模型进一步证明了PIK-75 /吉西他滨组合的作用。携带MIA PaCa-2肿瘤的小鼠与吉西他滨(20mg/kg)，PIK-75(2mg/kg)或两种药物的组合一起施用。由于PIK-75是一种可逆抑制剂，PIK-75每周给药5次，以确保维持足够的抑制作用。吉西他滨每周给药两次。吉西他滨或PIK-75可使肿瘤生长降至相似程度[3] |
| Cell Experiment |
将MIA PaCa-2细胞维持在含有10％热灭活的胎牛血清(HI-FBS)，2.5％马血清(HS)和100U/mL青霉素/链霉素的Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)中。 AsPC-1细胞在补充有20％HI-FBS，100U/mL青霉素/链霉素和1mM丙酮酸钠的RPMI-1640培养基中培养。每孔总共2，000个人胰腺癌细胞(MIA PaCa-2或AsPC-1)接种于96孔平底板中，然后用吉西他滨，单独PIK-75(0.1μM，0.3μM和1μM)处理)或两种具有指定浓度的药物的组合。在指定的时间，向每个孔中加入20μL的1mg/mL MTT的PBS溶液，并进一步温育~4小时。离心并除去培养基后，向每个孔中加入150μLDMSO以溶解甲crystals晶体。在562nm处测量吸光度。未处理细胞的吸光度指定为100％，相对活细胞表示为该值的百分比[3] |
| Animal Experiment |
将与Matrigel混合的小鼠[3] MIA PaCa-2细胞(~1.7×10 6个细胞/小鼠)皮下注射到6周龄的雄性无胸腺裸(Foxn1nu)小鼠的胁腹中。将吉西他滨(50mg/mL)溶解在PBS中，并将PIK-75(20mg/mL)溶解在DMSO中。注射溶液在无菌水中制成10％的Cremophor EL和3％的聚(乙二醇)400。在给予化合物之前，将吉西他滨在PBS中进一步稀释，并将DMSO或PIK-75在注射溶液中进一步稀释，并通过0.2μm过滤单元灭菌。将这些稀释剂以1：1的比例混合并施用到小鼠的腹膜腔中。吉西他滨(20 mg/kg)或吉西他滨(20 mg/kg)/ PIK-75(2 mg/kg)组合每周给药两次，载体对照和PIK-75(2 mg/kg)每周给药5次。 |
| Kinase Experiment |
在50μL的20mM HEPES，pH 7.5和含有180μM磷脂酰肌醇的5mM MgCl 2中测定PI3K酶活性，通过加入100μMATP(含有2.5μCi的[γ-32P] ATP)开始反应。在室温下孵育30分钟后，通过加入50μL1MHCl终止酶反应。然后用100μL氯仿/甲醇[1：1(v/v)]和250μL2MKCl提取磷脂，然后进行液体闪烁计数。将抑制剂(例如，PIK75))在20％(v/v)DMSO中稀释以产生浓度与酶活性曲线的抑制[2]。 |
| Data Literature Source |
[1]. Knight ZA，et al. A pharmacological map of the PI3-K family defines a role for p110alpha in insulin signaling. Cell. 2006 May 19;125(4):733-47.
[2]. Zheng Z，et al. Isoform-selective inhibition of phosphoinositide 3-kinase: identification of a new region of nonconserved amino acids critical for p110α inhibition. Mol Pharmacol. 2011 Oct;80(4):657-64.
[3]. Duong HQ，et al. Inhibition of NRF2 by PIK-75 augments sensitivity of pancreatic cancer cells to gemcitabine. Int J Oncol. 2014 Mar;44(3):959-69. |
| Unit |
Bottle |
| Specification |
10mg 50mg 100mg |
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