| CAS |
857531-00-1 |
| English Name |
AT 7867 |
| Synonyms |
达格列净;GVP;4-(4-(1H-pyrazol-4-yl)phenyl)-4-(4-chlorophenyl)piperidine |
| Molecular Formula |
C20H20ClN3 |
| Molecular Weight |
337.85 |
| Solubility |
Soluble in DMSO |
| Purity |
≥98% |
| Appearance |
White to off-white Solid |
| Storage |
Powder:2-8℃，2 years;Insolvent(Mother Liquid):-20℃，6 months;-80℃，1 year |
| MDL |
MFCD18384971 |
| SMILES |
ClC1=CC=C(C=C1)C2(CCNCC2)C3=CC=C(C=C3)C4=CNN=C4 |
| Target Point |
Akt;p70S6K;PKA |
| Passage |
PI3K/Akt/mTOR;MAPK;Stem Cells; Protein Tyrosine Kinase/RTK |
| Background |
AT7867 is an ATP-competitive inhibitor of Akt1/Akt2/Akt3 and p70S6K/PKA. |
| Biological Activity |
AT7867 是一种 ATP 竞争性的 Akt1/Akt2/Akt3 和 p70S6K/PKA 抑制剂，IC50 分别为 32 nM/17 nM/47 nM 和 85 nM/20 nM[1]。 |
| IC50 |
Akt2:17nM;Akt1:32nM;Akt3:47nM PKA:20nM [1] |
| In Vitro |
AT7867显示出针对结构相关的AGC激酶p70S6K和PKA的有效活性。体外生长抑制研究表明，AT7867阻断了许多人癌细胞系的增殖。 AT7867在抑制MES-SA子宫，MDA-MB-468和MCF-7乳腺，HCT116和HT29结肠系(IC50值范围为0.9-3μM)中的增殖效果最强，在两种前列腺中效果最差测试线(IC50值范围为10-12μM)[1]。 |
| In Vivo |
体内：以20mg/kg口服给药后，血浆中AT7867的消除似乎与静脉内给药后观察到的相似。在口服20mg/kg剂量后，AT7867的血浆水平保持在0.5μM以上至少6小时。假设静脉内给药后的线性药代动力学，通过口服途径的生物利用度计算为44％。因此，用该模型进行体内药效学(PD)生物标志物研究。在药代动力学和耐受性研究之后，将AT7867(90mg/kg po或20mg/kg ip)的剂量施用于携带MES-SA肿瘤的无胸腺小鼠，并随时间监测肿瘤中GSK3β和S6RP的磷酸化状态。在用AT7867处理后2和6小时观察到对途径活性的两种标志物的磷酸化的明显抑制。到24小时，GSK3β和S6RP的总水平大大降低[1]。 |
| Cell Experiment |
将细胞以每孔16，000个细胞接种于96孔微量培养板中，在补充有10％FBS的培养基中培养24小时，然后用AT7867处理。将AT7867或载体对照加入细胞1小时。然后，用3％多聚甲醛，0.25％戊二醛，0.25％Triton-X100固定细胞，洗涤并用含有0.1％Tween-20(TBST)的tris缓冲盐水中的5％牛奶封闭，然后与磷酸盐一起孵育过夜。 GSK3β(丝氨酸9)抗体。然后洗涤平板，加入二抗，并使用DELFIA试剂进行信号增强。将铕计数标准化为蛋白质浓度，并使用非线性回归分析和S形剂量响应(可变斜率)方程[1]在GraphPad Prism中计算每种抑制剂的IC 50值。 |
| Animal Experiment |
小鼠[1]使用雄性无胸腺BALB/c小鼠(nu/nu)。将单剂量的AT7867以5mg/kg静脉内(iv)和20mg/kg口服(po)给予BALB/c小鼠。在以下每个时间点从重复动物收集血浆样品;静脉内给药后0.083，0.167，0.33，0.67，1，2，4，6，16和24小时以及给药后0.25，0.5，1，2，4，6和24小时。通过心脏穿刺对小鼠进行放血，并且将所有血液样品离心以获得血浆，然后将其在-20℃冷冻直至分析。对于生物分析，通过用含有内标的乙腈进行蛋白质沉淀来制备所有血浆样品。通过与用AT7867构建的标准校准线和使用抑制剂特异性液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法进行比较，对样品提取物进行定量。确定药代动力学参数。 |
| Kinase Experiment |
AKT2，PKA，p70S6K和CDK2/cyclinA的激酶测定均以辐射测量滤光片结合形式进行。在化合物存在下建立测定反应。对于AKT2，AKT2酶和25μMAKTide-2T肽(HARKRERTYSFGHHA)在20mM MOPS，pH7.2，25mMβ-甘油磷酸盐，5mM EDTA，15mM MgCl 2，1mM原钒酸钠，1mM DTT，10中孵育。 μg/ mL BSA和30μMATP(1.16Ci/mmol)，持续4小时。对于PKA，将PKA酶和50μM肽(GRTGRRNSI)在2mM MOPS，pH7.2，25mMβ-甘油磷酸盐，5mM EDTA，15mM MgCl 2，1mM原钒酸盐，1mM DTT和40μMATP(0.88)中孵育。 C 1/mmol)20分钟。对于p70S6K，将p70S6K酶和25μM肽底物(AKRRRLSSLRA)在10mM MOPS，pH 7，0.2mM EDTA，1mM MgCl 2，0.01％β-巯基乙醇，0.1mg/mL BSA，0.001％Brij-35中孵育，0.5％甘油和15μMATP(2.3Ci/mmol)，持续60分钟。对于CDK2，将CDK2/cyclinA酶和0.12μg/ ml组蛋白H1在20mM MOPS，pH7.2，25mMβ-甘油磷酸盐，5mM EDTA，15mM MgCl 2，1mM原钒酸钠，1mM DTT，0.1mg中孵育。/ml BSA和45μMATP(0.78Ci/mmol)，持续4小时。通过加入过量的正磷酸终止测定反应，然后将停止的反应混合物转移到Millipore MAPH滤板中并过滤。然后洗涤板，加入闪烁剂，并通过Packard TopCount上的闪烁计数测量放射性。使用GraphPad Prism软件从重复曲线计算IC 50值。进行AKT1和3酶测定，同时进行所有其他酶测定[1]。 |
| Data Literature Source |
[1]. Grimshaw KM，et al. AT7867 is a potent and oral inhibitor of AKT and p70 S6 kinase that induces pharmacodynamic changes and inhibits human tumor xenograft growth. Mol Cancer Ther，2010，9(5)，1100-1110. |
| Unit |
Bottle |
| Specification |
2mg 10mg 20mg |
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