| CAS |
315183-21-2 |
| English Name |
PAC-1 |
| Synonyms |
Procaspase activating compound 1 |
| Molecular Formula |
C23H28N4O2 |
| Molecular Weight |
392.49 |
| Solubility |
Soluble in DMSO |
| Purity |
≥98% |
| Appearance |
White to yellow Solid |
| Storage |
Powder:2-8℃，2 years;Insolvent(Mother Liquid):-20℃，6 months;-80℃，1 year |
| MDL |
MFCD02051977 |
| SMILES |
O=C(N/N=C/C1=CC=CC(CC=C)=C1O)CN2CCN(CC3=CC=CC=C3)CC2 |
| Target Point |
Caspase |
| Passage |
Apoptosis |
| Background |
PAC-1 is a procaspase-3 activator. |
| Biological Activity |
PAC-1 是一种 procaspase-3 激活剂，诱导癌细胞凋亡，EC50 为 2.08 μM[1-3]。 |
| IC50 |
Procaspase-3:2.08μM(EC50)[1-3] |
| In Vitro |
Procaspase活化化合物-1(PAC-1)是第一个发现的直接激活caspase的化合物。 PAC-1处理上调多种细胞系中的Ero1α，而Ero1α的沉默显著抑制ER从细胞内释放钙和细胞死亡[2]。PAC-1表现出增强的锌螯合能力(EC50 =7.08μM)。 PAC-1诱导白血病细胞死亡，IC50为4.03μM，这与其他研究者报道的值一致。 PAC-1处理还导致其他恶性细胞以浓度依赖性方式死亡，IC50为4.03至53.44μM。 15种恶性细胞系中的总平均IC50对于WF-210为0.88mM，对于PAC-1为19.40μM。相反，正常人细胞(PBL，L-02，HUVEC和MCF 10A)对WF-210的敏感性比PAC-1低2.6倍(平均IC50 =412.34μM)(平均IC50 =158.29μM)[ 1]。 |
| In Vivo |
为了评估WF-210对恶性肿瘤生长的体内作用，我们检测了WF-210在小鼠Hep3B和MDA-MB-435异种移植模型中抑制肿瘤生长的能力。这两种细胞系以相对高的水平表达procaspase-3。允许由肝癌细胞Hep3B的异种移植物诱导的肿瘤发展并生长至100mm 3的大小，之后每天给予WF-210(2.5mg/kg)或PAC-1(5.0mg/kg)两周。通过静脉内(iv)给药。如PAC-1和WF-210所示，显著抑制Hep3B肿瘤异种移植物的生长[1]。 |
| Cell Experiment |
使用MTT方法或Cell Titer-Glo发光测定法测量细胞活力。对于MTT测定，将细胞(1×10 5个细胞/ mL)接种到96孔培养板中。孵育过夜后，用各种浓度的试剂(PAC-1，WF-210或其他试剂)处理细胞24或72小时。然后向每个孔中加入10mL MTT溶液(在PBS中2.5mg/mL)，并将板在37℃下再温育4小时。离心(2500rpm，10分钟)后，吸出含有MTT的培养基，加入100mL DMSO。用Biotek Synergy HT读数器在570nm处测量每个孔的光密度。 Cell Titer-Glo试剂盒用于确定细胞内ATP作为活细胞生物标志物的相对水平[1]。 |
| Animal Experiment |
小鼠[1]确定WF-210，活人胆囊癌GBC-SD细胞(每只小鼠5×106/100 mL PBS)，人乳腺癌MDA-MB-435细胞的体内抗肿瘤活性(1×每只小鼠107/100 mL PBS)，人肝癌Hep3B细胞(每只小鼠5×106/100 mL PBS)和人乳腺癌MCF-7细胞(每只小鼠1×107/100 mL PBS)皮下注射(sc)进入7至8周龄雄性SCID小鼠或Balb/c裸鼠的右侧腹侧。在注射前通过台盼蓝染色确认细胞数。特别地，MCF-7异种移植小鼠也在隔天给予激素17-β-雌二醇(3mg/kg)。当平均sc肿瘤体积达到100mm 3时，将小鼠随机分成各种治疗组和对照组(每组8只小鼠)。用卡尺每两天测量肿瘤大小(计算体积=最短直径2×最长直径/ 2)。每两天记录一次体重，饮食消耗和肿瘤大小。两周或四周后，处死小鼠并切除肿瘤并储存在-80℃直至进一步分析。 |
| Kinase Experiment |
将各种浓度的WF-210或PAC-1加入到含有50mM HEPES，0.1％CHAPS，10％甘油，100mM NaCl，0.1mM EDTA，10mM DTT pH 7.4的缓冲液中的procaspase-3中，并孵育12小时。在37°C。最终体积为10mL，procaspase-3的最终浓度为1mM。然后加入40mL含有50mM HEPES pH 7.4，100mM NaCl，10mM DTT，0.1mM EDTA二钠盐，0.10％CHAPS，10％甘油的缓冲液中的底物Ac-DEVD-pNA(终浓度0.4mM)。在405nm处读取板的吸光度总共1小时。每个孔的线性部分的斜率被确定为酶活性[1]。 |
| Data Literature Source |
[1]. Wang F，et al. A novel small-molecule activator of procaspase-3 induces apoptosis in cancer cells and reduces tumor growth in human breast，liver and gallbladder cancer xenografts. Mol Oncol. 2014 Dec;8(8):1640-52.
[2]. Seervi M，et al. ERO1α-dependent endoplasmic reticulum-mitochondrial calcium flux contributes to ER stress and mitochondrial permeabilization by procaspase-activating compound-1 (PAC-1). Cell Death Dis. 2013 Dec 19;4:e968.
[3]. Putt KS，et al. Small-molecule activation of procaspase-3 to caspase-3 as a personalized anticancer strategy. Nat Chem Biol. 2006 Oct;2(10):543-50. |
| Unit |
Bottle |
| Specification |
5mg 10mM*1mL in DMSO 10mg 20mg |
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