| CAS |
1234480-84-2 |
| English Name |
LRRK2-IN-1 |
| Molecular Formula |
C31H38N8O3 |
| Molecular Weight |
570.69 |
| Solubility |
Soluble in DMSO |
| Purity |
≥98% |
| Appearance |
Light yellow to yellow Solid |
| Storage |
Powder:-20℃，2 years;Insolvent(Mother Liquid):-20℃，6 months;-80℃，1 year |
| MDL |
MFCD22683805 |
| SMILES |
O=C(C1=CC(OC)=C(NC2=NC=C3C(N(C4=C(C(N3C)=O)C=CC=C4)C)=N2)C=C1)N5CCC(CC5)N6CCN(CC6)C |
| Target Point |
LRRK2 |
| Passage |
Autophagy |
| Background |
LRRK2-IN-1 is a potent and selective LRRK2 inhibitor. |
| Biological Activity |
LRRK2-IN-1 是一种有效的, 选择性的 LRRK2 抑制剂, 作用于 LRRK2 (G2019S) 和 LRRK2 (WT) , IC50 值分别为 6 nM 和 13 nM[1-4]。 |
| IC50 |
IC50: 13nM (WT) ， 6nM (G2019S) [1-4] |
| In Vitro |
野生型和G2019S转导导致TR-FRET信号高2.5倍，LRRK2-IN-1可以剂量依赖性方式抑制，IC50值分别为0.08μM和0.03μM[1]。 LRRK2-IN-1对DCLK2的抑制具有45nM的IC50，并且当在AURKB，CHEK2，MKNK2，MYLK，NUAK1和PLK1的生化测定中评估时，IC50显示大于1μM。确认LRRK2-IN-1抑制MAPK7，EC50为160nM。 LRRK2-IN-1诱导Ser910和Ser935磷酸化的剂量依赖性抑制，伴随14-3-3与野生型LRRK2和稳定转染HEK293细胞的LRRK2 [G2019S]的结合丧失[2]。 LRRK2-IN-1具有中等细胞毒性，HepG2细胞中IC50为49.3μM。 LRRK2-IN-1在存在和不存在S9时分别在15.6和3.9μM时表现出遗传毒性[3]。 LRRK2-IN-1抑制增殖，迁移和诱导细胞死亡，具有HCT116和AsPC-1细胞凋亡的标志[4]。 |
| In Vivo |
LRRK2-IN-1(100 mg / kg，ip)诱导小鼠肾脏中LRRK2的去磷酸化[2]。瘤周注射LRRK2-IN-1(100mg / kg)导致肿瘤体积和AsPC-1肿瘤异种移植物重量的显着降低[4]。 |
| Cell Experiment |
将细胞(每孔104个细胞)一式三份接种到96孔组织培养板中。在存在LRRK2-IN-1的情况下，用DMSO作为载体，在0，0.31，0.63，1，2和5，10和20μM下培养细胞。处理后48小时，向每个孔中加入10μLTACSMTT试剂，并将细胞在37℃温育直至细胞中可见深色结晶沉淀。然后将100μL在DMSO中的266mM NH 4 OH加入孔中并以低速放置在平板振荡器上1分钟。摇动后，将平板在光照下孵育10分钟，并使用酶标仪读取每个孔的OD550。将结果平均并计算为DMSO(媒介物)对照的百分比+/-平均值的标准误差。 |
| Animal Experiment |
将LRRK2-IN-1溶解于Captisol中，并通过腹膜内注射给予野生型雄性C57BL / 6小鼠，剂量为100mg / kg。对照小鼠注射等体积的Captisol。在1小时和2小时的时间点，通过颈椎脱位对小鼠进行熄灭，并快速解剖肾脏和脑组织并在液氮中快速冷冻。 |
| Kinase Experiment |
活化GST-LRRK2(1326-2527)，GST-LRRK2 [G2019S](1326-2527)，GST-LRRK2 [A2016T](1326-2527)和GST-LRRK2 [A2016T + G2019S](1326-2527)酶被纯化在瞬时转染合适的cDNA构建体后36小时，用来自HEK293细胞裂解物的谷胱甘肽琼脂糖凝胶。一式两份进行肽激酶测定，在50mM Tris / HCl，pH 7.5，0.1mM的50mM Tris / HCl中，含有0.5μgLRRK2激酶(纯度约10％，终浓度为8 nM)的总体积为40μL。 EGTA，10mM MgCl2，20μMN含，0.1μM[γ-32P] ATP(500cpm / pmol)和指定浓度的抑制剂溶解在DMSO中。在30℃温育15分钟后，通过将35μL反应混合物点在P81磷酸纤维素纸上并浸入50mM磷酸中终止反应。广泛洗涤样品，通过切伦科夫计数定量[γ-32P] ATP向Nictide中的掺入。使用GraphPad Prism使用非线性回归分析计算IC 50值。 |
| Data Literature Source |
[1]. Hermanson SB， et al. Screening for Novel LRRK2 Inhibitors Using a High-Throughput TR-FRET Cellular Assay for LRRK2 Ser935 Phosphorylation.PLoS One. 2012; 7 (8) :e43580. Epub 2012 Aug 28.
[2]. Deng， Xianming.， et al. Characterization of a selective inhibitor of the Parkinson's disease kinase LRRK2. Nature Chemical Biology (2011) ， 7 (4) ， 203-205.
[3]. Koshibu K， et al. Alternative to LRRK2-IN-1 for Pharmacological Studies of Parkinson's Disease. Pharmacology. 2015; 96 (5-6) :240-7.
[4]. Weygant N， et al. Small molecule kinase inhibitor LRRK2-IN-1 demonstrates potent activity against colorectal and pancreatic cancer through inhibition of doublecortin-like kinase 1. Mol Cancer. 2014 May 6; 13:103 |
| Unit |
Bottle |
| Specification |
5mg 10mg |
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