| CAS |
1009817-63-3 |
| Chinese Name |
(3E,5E)-3,5-二[(4-硝基苯基)亚甲基]-1-(1-氧代-2-丙烯-1-基)-4-哌啶酮 |
| English Name |
(3E,5E)-1-Acryloyl-3,5-bis(4-nitrobenzylidene)piperidin-4-one |
| Synonyms |
NSC687852;S4920;b-AP15; |
| Molecular Formula |
C22H17N3O6 |
| Molecular Weight |
419.39 |
| Solubility |
Soluble in DMSO |
| Purity |
≥98% |
| Appearance |
Light yellow to yellow Solid |
| Storage |
Powder:2-8℃，2 years;Insolvent(Mother Liquid):-20℃，6 months;-80℃，1 year |
| MDL |
MFCD26142662 |
| SMILES |
O=C1/C(CN(C(C=C)=O)C/C1=C\C2=CC=C([N+]([O-])=O)C=C2)=C/C3=CC=C([N+]([O-])=O)C=C3 |
| Target Point |
Deubiquitinase（DUB） |
| Passage |
Ubiquitin |
| Background |
(3E,5E)-1-Acryloyl-3,5-bis(4-nitrobenzylidene)piperidin-4-one is an inhibitor of deubiquitinases. |
| Biological Activity |
b-AP15 特异性抑制去泛素化酶 (deubiquitinating) UCHL5 和 Usp14活性。[1-3] |
| In Vitro |
用指定浓度的b-AP15处理纯化的19S蛋白酶体(5nM)，通过检测Ub-AMC切割确定DUB活性。使用非线性回归分析从Graph Pad Prism中的对数浓度曲线确定IC 50值(2.1±0.411μM)。 b-AP15作为先前未鉴定的一类蛋白酶体抑制剂，其废除了19S调节颗粒的去泛素化活性。 b-AP15抑制两种19S调节颗粒相关的去泛素化酶，遍在蛋白C-末端水解酶5(UCHL5)和遍在蛋白特异性肽酶14(USP14)的活性，导致多聚泛蛋白的积累。 b-AP15诱导的肿瘤细胞凋亡对TP53状态不敏感，凋亡抑制因子BCL2过表达[1]。使用Ub-AMC作为底物，确定b-AP15的能力抑制蛋白酶体脱遍在蛋白酶活性。观察到IC50为16.8±2.8μM[2]。 b-AP15是一种特异性的USP14和UCHL5抑制剂，可阻断MM细胞的生长并诱导细胞凋亡[3]。 |
| In Vivo |
b-AP15(2.5mg / kg)抑制同系小鼠模型中的肿瘤生长，其给药时间表较少。我们使用2-d-on，2-d-off计划对患有Lewis肺癌(LLCs)的C57BL / 6J小鼠施用b-AP15，并使用1-d-给予具有原位乳腺癌(4T1)的BALB / c小鼠。三维计划表。 b-AP15在两种模型中显著抑制肿瘤生长，对于C57BL / 6J小鼠，T / C = 0.16(P≤0.01)，对于BALB / c小鼠，T / C = 0.25(P≤0.001)。在用b-AP15治疗的4T1乳腺癌小鼠组中也观察到肺转移灶数量的减少[1]。 |
| Cell Experiment |
通过荧光微量培养细胞毒性测定或MTT测定监测细胞活力。对于MTT测定，将细胞接种到96孔平底板中过夜并暴露于药物，使用DMSO作为对照。在孵育结束时，向每个孔中加入10μl5mg/ mL MTT的储备溶液，并将板在37℃下孵育4小时。将Formazan晶体用100μL10％SDS / 10mM HCl溶液在37℃下溶解过夜。使用酶联免疫吸附测定(ELISA)读板仪在590nm处测量吸光度[2]。 |
| Animal Experiment |
小鼠[1]对于鳞状细胞癌模型，将1×106个FaDu细胞皮下注射到雌性SCID小鼠的右后腹侧。通过公式长度×宽度2×0.44测量肿瘤生长。当肿瘤长到大约200 mm3(定义为第0天)时，小鼠随机接受每日皮下5 mg / kg体重的载体(n = 10)或b-AP15(n = 15)注射。对于结肠癌模型，我们将过量表达Bcl2的2.5×106 HCT-116结肠癌细胞皮下注射到雌性裸鼠的右侧。我们通过腹膜内注射给予小鼠每kg体重5mg b-AP15。对于肺癌模型，我们将2×105 LLC细胞皮下注射到雌性C57 / B6小鼠的右后侧。当肿瘤生长到大约50 mm3(定义为第0天)时，我们将小鼠随机分组接受载体(n = 4)或b-AP15(n = 4)，腹腔注射5 mg / kg体重，治疗周期包括2天治疗，然后休息2天(2天开，2天关闭)，持续2周。 |
| Kinase Experiment |
对于去泛素化酶抑制测定，19S调节颗粒(5nM)，26S(5nM)UCH-L1(5nM)，UCH-L3(0.3nM)，USP2CD(5nM)USP7CD(5nM)USP8CD(5nM)或将BAP1(5nM)与DMSO或b-AP15一起温育，并使用Wallac VICTOR Multilabel计数器或配备有380nm激发和460nm发射滤光器的Tecan Infinite M1000监测遍在蛋白-AMC(1，000nM)的切割[1]。 |
| Data Literature Source |
[1]. D'Arcy P，et al. Inhibition of proteasome deubiquitinating activity as a new cancer therapy. Nat Med. 2011 Nov 6;17(12):1636-40.
[2]. Wang X，et al. The 19S Deubiquitinase Inhibitor b-AP15 is Enriched in Cells and Elicits Rapid Commitment to Cell Death. Mol Pharmacol. 2014 Jun;85(6):932-45.
[3]. Tian Z，et al. A novel small molecule inhibitor of deubiquitylating enzyme USP14 and UCHL5 induces apoptosis in multiple myeloma and overcomes bortezomib resistance. Blood. 2014 Jan 30;123(5):706-16 |
| Unit |
Bottle |
| Specification |
5mg 10mg |
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